blog

>Aplicați microscopia pentru rezistența la fluorescență

Aplicații multiple sunt concentrate, de exemplu, interacțiuni celulare și activități membranei. Investigate exiile exocytozei ínn cellulele pulmonare au used capacitatea duală de detects activitate și modurile structurale pe care microscopy which forță de fluorescence is for a analysis eventele de exocytosis și effects the asupra cellsi.

Dacă nu am informațiile corecte, vă rugăm să consultați telefonul mobil, dacă am un telefon mobil, vă voi sprijini la nivelul normal. Acest lucru a furnizat primele dovezi ale naturii dynamize ipotezate a cellulelor I took exocytozei lens a corpurilor lamelare.

Într-un domeniu tânăr al microscopiei, microscopy with fluorescence for this explorată și dezvoltată continuu. Recent, evoluția a fost posibilă cu o microscopie a cărei fluorescență este bună pentru o singură moleculă.

Forma de colectare trebuie efectuată dacă este evaluată, dacă se pare că este corectă exact fluorescența microscopului, este corectă într-o fabrică. Recent December au produs în continuu imagini cu precizie îmbunătățită folosind fluorescență corelativă și microscopie de forță, demonstrează și tehnică această promițătoare pentru aplicații viitoare.

Surse

Sarkar, A. și colab. (2004). Microscop of force atomică simultan i măsurători fluorescent al defaurării proteinelor using or undă evanescentă calibrată. Lucrările Academiei Naționale de Științe din Statele Unite ale Americii.

Hecht, E. și colab. (2012). Microscop combinat cu microscop cu cu atomică – microscop cu fluorescență: analizează exocitoza în alveolar cell of tip II. Chimie analytică.

Frederick, W. și colab. (2018). Testarea orthtogonală eterogenității unei singure molecule prin fluorescență corelativă și microscopie de forță. ACS Nano.

Ultima actualizare: 17 ani 2020

Revizuirea „Https://www.news-medical.net/life-sciences/FRET-Fluorophores.aspx”

De la Jeyashree Sundaram, MBA

Fluoroforul this regiunea specifică sau domeniul structural la o protein care prezintă fluorescență. The original spectroscopy of fluorescence, fluoroforii prezintă cea mai semnificativă part to imaginii interactiunilor proteină-proteină.

Marginea unei tumors in care level diferitelor protein au fost testing for uses anticorpillor brandi with fluorophores. Credit: Carl Dupont / Shutterstock.com

Diphtheria fluorophore protein available in imaginea mai multor procese biologice, de exemplu, protein sensitive to the pH value used in the Assessment of pH-ul, în timp ce proteinele fluorofore with lungimi de undă de excitație și emisie lungi pot fi use only in țesuturi, care prezintă spontaneous fluoresceni lungimi de undă de excitație mai scurte. Îngrijirea tehnică implică interacțiunea în fluorurii zone care this user for the select biologic system for the fluorescence primary transfer of energy (FRET).

Fluorofor tipuri

Fluoroforii sunt clasificați în două principal group: intrinseci și extrinseci. Fluoroforii care sunt obținuți în mod natural sunt denumiți intrinsici, de exemplu, aminoacizi aromatici, piridoxal derivative, flavine, NADH și chlorophyll.

Fluorescence poate fi, from also, produs prin suplimentarea fluoroforilor the proba care nu conține conține conține proprietate fluorescentă sau main modification spectral properties ale probei. Asphalt of fluorophores care are artificial for ingestarea to fluorescein are numiți extrinsic fluorophores, cum ar fitolamine, fluorescein, dansilul și diverse old substanțe.

Condiții fluorophore în analize FRET

FRET this or interaction dependentă of distană between doi fluorophores. În FRET, el a ieșit din entuziasm cu un donator de fluorofor și transferul de energie către un fluorofor acceptor fan emits a light. Acceptatorul absorbs energy apoi apoi emits lumină vizibilă; folosind a cititor specializat losesrea și cáștigul fluorescenței la donator accepti acceptor pot fi certain cu precizie. Pentru performs acest lucru, FRET trebuie să îndeplinească mai multe condiții.

Proximitate

Pentru a prelucra eficient FRET, donor fluorophores și acceptori trebuie să fie păstrați unul lângă altul.

Suprapunere spectrală

Emitting energy of fluorophore donator trebuie is suppressed plague spectrul absorbit al acceptorului. Cu intensitatea suprapunerii spectral this mai mare, cu up to this mai ma posibilități apariției FRET.

Orientarea dipolului

Prin cuplarea intermoleculară dipol-dipol, schimbarea energiei are loc de la donator la fluorofor acceptor. Orientările dipolului dintre cei do fluorofori sunt de obicei presupun a fi aleatorii din canalul rotațiilor moleculare rapide.

FRET din mai fines căi in ADN-ul marcat cu fluorofor

Povești Connect

Schelele DNA offers its adreseazăbenei pentru stabilirea fluoroforilor în antene complexe care recoltează lumina. Deși dimensiuni și complexitate rețele DNA-fluorophore crește, poate fi foarte dificil să fie înțelept proprietățile transferului de energie datorită unui număr semnificativ de interac dipiuni dipolar în fluorochrome.crema recardio

Folosind combina starch spectroscopy of echilibru și rezolvarea timpului, proprietate FRET sunt ilustrate și decipher folosind theory Förster. FRET efficiency created with more multiple FRET, it appears homo-FRET găsit între donatori permite accesul canalului paralel la acceptor și, astfel, contracarea eficientă a școlii la FRET.

In general, if you need multiple pentru un proiect dispozitive artificial pentru recoltarea luminilor pentru un compensate group of effect neomogene și neideale care scad efficiena FRET.

Analize FRET prin fluorophores cu puncte quantize

FRET is a photofizic instrument extreme of puternic care transfer energy de excitație nonradiativă with fluorofor acceptor la starea de bază. Această extremitate a sensibilităților acestei modificări de cicatrice, nanomatică, la donator’s distance, acceptor, orient, dipolar informații.

To dobândit the wide range of application in studies of conform to proteinelor, chimie elettică și tests biologice. Nanocrystalline luminescent, quantum punctuated, anorganic fluorophores with proprietary spectroscopice and photosensitive distinctive care ar putea promote FRET as instrument analytic datorită spectrului său de excitație mai larg și a fotoemisiei fine slabimetrice și regéta. Folo are FRET the cantitate luminiscentă, studiul is concentration and will approach the application of the vizier în diferite studii.

Fluorofori folosesc pentru FRET

Perechi FRP CFP-YFP

Perechile of cyan-galben fluorophoring protein (CFP-YFP) sunt cele mai comune comune frecvente perechi FRET de fluorophoring protein. A benefit to the donator of cyan, cum ar fi mTurquoise2, mCerulean3 și Aquamarine, this CFP-uri genetically modified cateva un randament semificativ ridicat. De asemenea, pentru cea mai lungă perioadă de timp prin iapă până la fluorescenă. YFP-urile use frecvent, cum ar fi mVenus, mCitrine, YPet și sEYFP, sunt mai puțin receptive la clorură și pH și foarte stabil la expunerea luminii.

În schimb, pechile CFP-YFP is confruntă with many legitim problem of FRET, of example photoblanșarea rapidă YFP, converting YFP în fluorofori asemănători CFP-urilor și fototoxicitatea. Biosenzorii FRET by CFP-YFP offers a relative dynamic interval scăzut în timp ce sunt used în biosenzorii FRET by kinază. Alternativ, fluoroforul non-autofluorescent numit proteină to bind the lumazină s-a dovedit to avea success ca donator FRET.

GFP-RFP FRET perechi

Green fluorofor parsley și roșu depășesc dezavantajele perechilor CFP-YFP FRET. Excitement proteinelor roșu-verde provoacă mai puțină autofluorescență, fototoxicitate și sau to separate spectrală mai mare. Un fluorofor verde pentru promovarea acestuia extinde un donator eficient pentru mRUBY2, acceptor al fluoroproteinei.

Evolution fluoroforilor verzi și roșii we, care sunt verzi strălucitori și fotostabili, the aplicații aplicate FRET bazate pe intensitate. Green fluorophor donatorii strălucitor sunt Clover, mClover3 și mNeonGreen. Until acceptorii roșii, Cât și donatorii verzi au făcut fluoroforul FRET green-roșu și mai atractiv în celulele vii.

Perechi FFP – IFP FRET

Perchile fluoroforilor cu roșu îndepărtat și infraroșu (FFP-IFP) au fost utile în principal principal pentru imagistică țesutului depth datorită absorbsiei hemoglobinei și a dispersiei reduse a luminii. Access to fluorophores this more avantajoasă decât perechile GFP-RFP în monitorizar molecular processelor în țesuturile mamiferelor.

Surse:

    Lecturi înainte de suplimente

    Ultima actualizare: 26 februarie 2019

    „Http://www.news-medical.net/life-sciences/DNA-and-Technology.aspx” Din Revizuit de

    DNA-ul și molecular biology au avansat cu pași mari. To find I will use in pharmacology, genetic engineering în preventirea bolilor, în creșterea creiiterii agricole, în detect bolilor și a criminalității (criminalistică) etc.

    Unele domenii care au demonstrat o creștere remarcabilă datorită progresului în DNA technology including:

    • criminalist
    • bioinformatică
    • farmacologii și nanotehnologie
    • arheology și anthropometry

    DNA Tehnology în criminalistică

    Ul-ADN încapsulează unic. Deoarece acest unic, abilitatea de a examina ADN-ul găsit locul locul crimei acest un instrument criminalistic util foarte. Metodă comună utilizată pentru a-l identifica descrierea ADN-ului profilului include – Restriction fragment length polymorphism (RFLP) Shorti Short tandem repeat profile (STR).

    Polymorphism of lungime to fragmentului de restric (ie (RFLP)

    RFLP, DNA-ul this has a segment of different lungimi from stone or enzyme, supports segmentele sunt separate pe baza marimii folosind or tehnică numită electroforeză.

    Fragment of DNA din sau anumită lungime sunt transferate pe sa nylon membrane. Acestea sunt asortate fragmentul de DNA care this radioactive marcat care poate fi găsit cu succes.

    Fragmentele radioactive în excess sunt spălate și or radiograph a fragmentelor rămase luate.

    Electrophoresis is applied with a positive cure or negative gel base that allows DNA-ului să migreze către polul pozitiv (this is negative). Fragmentele etichetate separat în funcții de marimea lor. Access offer or imagine without care dintre fragmentele label.

    Profil repetat scurt în tandem (STR)

    Profilarea repetată scurtă în tandem (STR) implies using an enzyme cu multe fațete cu sau copii multiple la aceleași micro-secțiuni la DNA-ului. Acest lucru găsește în continuare după tăiată în bucăți de la altă enzimă și separat prin electroforeză. Fragmentele sunt apo vizualizate cu o argint pată, modelul benzi deschise și întunecate văzute fiind caracteristice pentru un individ.

    DNA în bioinformatică

    Povești Connect

    În ultimele decenii s-au înregistrat progrese rapide în proiectul genomului uman și în biotehnologii. Make progress in the future with a set of date complex asociate cu cunoștințe profundate, de exemplu, genomice ale multor specii, profiluri to express the microarray-ului de linii celulare diferite, polymorphism cu nucleotide unice (SNP ț etc.)

    Acest lucru a dat naștere unui nou domeniu la bioinformaticii are sau utilitate vaste în industria farmaceutică. Cele două tehnici interesante care au apărut includ tehnologia secvențierii genomului și tehnologia cipului DNA.

    Seează că fiecare genomul uman are aproximativ 30,000 of gene, care, not mod surprinzător, are do estima 3% din genom. It expresses these gene, add quantity of produse proteice care trebuie made in-o cellulă, this strict reglementată astfel încât să îndeplinească cerințele celulelor specifice și ca celulele să răspundă schimbărilor din mediul lor. Un obiectiv central pentru biologia moleculară este acesta care ne permite să reglăm elementul proteic.

    ADN-ul conține the cantitate mare de secvențe necodificate și nefuncționale. Acestea rămân oprite și conțin mutant gene sau cele adverts din alte organism, from example, viruși și bacterii.

    The mare part din acceste DNA lipss encoded nici o proteină era num până în prezent „DNA nedorit”. Acum, într-o serie de lucrări publicate în septembrie în Nature (Scientific American face part of the Nature Publishing Group) și în alte părți, group ENCODE Acest lucru a pregătit căi de decoperire the human bolilor de-a lungul timpului.

    DNA în farmacologie și nanotehnologie

    Three-dimensional nanostructurile pot deține și medically clears și by rule plierea proteinelor. Get the potențială claritate în terapie genică.

    Implicit genic therapy uses a specific molecule that carry the enzyme corectivă sau medicamentul către genă defectă exactă or identifies și or corectează. Nanotuburil DNA poate fi folosit in gene therapy. From obicei, DNA-ul viral this used ca vehicul care merge thisi this introdus într-o genă străină. Acensta fost numerotată transfecie.

    DNA-ul în arheology și anthropometries

    Analyze DNA-ului extras din specimen arheologice poate fi folosit pentru a tackle întrebări anthropologice. Acest lucru ajută la urmărirea evolued DNA-ului, a model migratoare și a evoluției speciilor de-a lungul vercurilor.

    Surse

    Lecturi înainte de suplimente

    Ultima actualizare: 8 aprilie 2019

    “Http://www.news-medical.net/life-sciences/Cell-Cycle-Dependent-Regulation-of-Cell-Adhesions.aspx” Din Revizuit de

    Adhere to a cell or suprafață this esențială pentru multe process cellular, including cell cycle. Acest articol va descrie studii recent care ne-au extinct cunoștințele fără rolul adesențelor focal în cell cycle.

    Sari the:

    Rattiya Thongdumhyu | Shutterstock

    Cercetare recentă

    Două Studies recent (Dix și colab., 2018 și Lock coi colab., 2018) au descris modul în care celulele mitotice Extracellular adhesion matricea pe tot parcursul ciclului cell.

    Dix și colegii săi au descoperit că loserea proteinelor paxilină, talină și talina zyxin au fost legate de rotunjirea celulară și de focal demontadadrenței. Interesting this is the fundamental nature of the complex of adeziune bazală de la aceste situri au rămas active in timpul ciclului cellular, implicându-le ca mediatori cheie ai mitozei.

    Lock și collab. To identification and continue a new complex of adherență care avea or structură asemănătoare rețelei și this accumulation with sub number of adherențe reticular. Adeziunile reticulare predominant sunt printr-un tip specific de integrină, αVβ5. Aceste integrate sunt unice prin care sunt capabile să funcționeze independent. Integrinele αVβ5 pot, totuși, interacts with a distinct group of protein care posedă propria lor morfology: talină, paxilină și zigină.

    What if schimbă adesențele focale în timpul ciclului cell?

    Povești Connect

    Operează Jones coli colab. (2018) the offer the perspectives asupra modului în care progresează ciclul cellular affectează asamblarea și demontarea adesenței focal. The first observation of the cretere to zone 2D to Adesenței focal tuna cand cell progressing from the G1 face the S. This lucru face coincide with the cretereal cell.

    The area of ​​vârf a fost înregistrat mai târziu la sfârșitul do S, suprapunandu if cu începutul G2, după care zona colorată cu paxilină a scăzut. În plus față de modi fluctuante ale zonei, autorei au observat schimbări în localizarea accesului la focal – adesențele focale colorate cu paxilină au fost localize the periferie cellulei the thirteen of the face G1 the face S.

    Distribute s-a extints to include centralif și perifericul în timpul fazei S, în conformitate cu zona maximă the focal adherenței în timpul ultimului capăt al fazei S / G2 timpuriu. Focal Adesenței focal în timpul tranziției of the face S the G2 to first confirm the microscopy with the cell vii and până la sfârșitul G2, au rămas donate focal periferic adhesion.